生物化粧品檢測

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篇一：化粧品微生物檢測

不同品牌的化粧品中微生物污染狀況檢測

[目的要求]

1、學會化粧品中菌落總數及黴菌、酵母總數的檢測方法及檢測原理；

2、檢測市場上一些化粧品的微生物是否超標；

[實驗原理]

任何一種化粧品或藥物，在生產、保存、運輸和使用過程中，由於各種不同的原因，其產品質量可能發生質變。這些原因其一就是由所謂微生物所造成的，微生物是一羣形體極微小的生物，它一般包括細菌、酵母菌、黴菌和病毒等。化粧品或藥物受到微生物的污染，可引起產品物理性狀（如色澤、氣味等）變化，改變產品有效成份，有的還會引起致敏、毒素和病毒感染，因此必須嚴格控制化粧品或藥物中的微生物。菌落總數是指檢樣經過處理，在一定條件下培養後(如培養基成分，培養温度，培養時間，pH值，需氧性質等)，1g(1mL)檢樣中所含菌落的總數。所得結果只包括一羣本方法規定的條件下生長的嗜中温的需氧性菌落總數。

黴菌和酵母菌總數是指檢樣在一定條件下培養後，1g或1mL化粧品中所污染的活的黴菌和酵母菌菌落總數，藉以判(轉載於:l裝無菌生理鹽水；9ml裝無菌生理鹽水；9cm滅菌平板，錐形瓶，玻璃塗棒，移液槍；Tip頭；培養箱；水浴鍋；無菌棉籤；超淨工作台；高壓蒸汽滅菌鍋等。

[實驗步驟]

一、化粧品的微生物學污染狀況檢測

1、樣品採集

按無菌方法隨機抽取各種品牌牙膏、成人護扶品（膏、霜、洗面奶、爽膚水、粉餅等）、嬰幼兒用護扶品（爽身粉、面霜等）。

2、樣品預處理

在化粧品中通常都加入了防腐劑，使化粧品能較長時間使用而不腐敗變質，因此在進行化粧品衞生細菌學檢驗時，必須消除化粧品中的防腐劑，使長期處於瀕死狀態或半損傷狀態的細菌被檢出，從而得出正確的檢驗結果。

消除防腐劑抑菌作用的方法，常用的方法有：

（1）稀釋法：用稀釋液和培養基將樣品稀釋到一定濃度，使其抑菌成分的濃度減少到無抑菌作用的程度，再進行檢驗。

（2）中和法：在供試液或培養基中加入中和劑，以中和防腐劑的抑菌效果。防腐劑種類不同所用的中和劑亦不同。本實驗採用吐温80+卵磷脂來做中和劑。

3、樣品的製備

（1）液體樣品

1水溶性的液體樣品，量取10mL加到90mL滅菌生理鹽水中，混勻後，製成1：10檢液○

2油性液體樣品，取樣品10mL，先加5mL滅菌液體石蠟混勻，再加10mL滅菌的吐温80，在40℃～○

44℃水浴中振盪混合10min，加入滅菌的生理鹽水75mL(在40℃～44℃水浴中預温)，在40℃～44℃水浴中乳化，製成1：10的懸液。

（2）膏，霜，乳劑半固體狀樣品

1親水性的樣品，稱取10g，加到裝有玻璃珠及90mL滅菌生理鹽水的三角瓶中，充分振盪混勻，靜置○

15min。.取其上清液作為1：10的檢液。

2疏水性樣品，稱取10g，放到滅菌的研缽中，加10mL滅菌液體石蠟,研磨成粘稠狀，再加入10mL滅○

菌吐温80，研磨待溶解後，加70mL滅菌生理鹽水，在40℃～44℃水浴中充分混合，製成1：10檢液。

（3）固體樣品，稱取10g，加到90mL滅菌生理鹽水中，充分振盪混勻，使其分散混懸，靜置後，取上清液作為1：10的檢液。

如有均質器，上述水溶性膏，霜，粉劑等，可稱10g樣品加入90mL滅菌生理鹽水，均質1min～2min；疏水性膏，霜及眉筆，口紅等，稱10g樣品，加10mL滅菌液體石蠟，10mL滅菌吐温80，70mL滅菌生理鹽水，均質3min～5min。

4、菌落總數檢驗

（1）用滅菌吸管吸取1：10稀釋的檢液2mL，分別注入到兩個滅菌平皿內，每皿1mL。另取1mL注入到9mL滅菌生理鹽水試管中(注意勿使吸管接觸液麪)，更換一支吸管，並充分混勻，製成1：100檢液，各吸取1mL，分別注入到兩個滅菌平皿內。如樣品含菌量高，還可再稀釋成1：1000，1：10000，……等，每種稀釋度應換1支吸管。

（2）將融化並冷至45℃～50℃的卵磷脂吐温80營養瓊脂培養基傾注到平皿內，每皿約15mL，隨即轉動平皿，使樣品與培養基充分混合均勻，待瓊脂凝固後，翻轉平皿，置37℃培養箱內培養48h。另取一個不加樣品的滅菌空平皿，加入約15mL卵磷脂吐温80營養瓊脂培養基，待瓊脂凝固後，翻轉平皿，置37℃培養箱內培養48h，為空白對照。

5、黴菌和酵母菌數的檢測

取1：10的檢液各1mL分別注入2個滅菌平皿內,(若菌量較多時可順序再做10倍稀釋)，另取1個滅菌空平皿(作空白對照)，每皿分別注入融化並冷至45℃左右的.虎紅培養基約15mL，充分搖勻。凝固後，翻轉平板，置28℃培養箱，培養3天，計數平板內生長的黴菌和酵母菌數。若有黴菌蔓延生長，為避免影響其它黴菌和酵母菌的計數時，於48h應及時將此平板取出計數。

6、菌落計數方法

（1）菌落總數技術

先用肉眼觀察，點數菌落數，然後再用放大5～10倍的放大鏡檢查，以防遺漏。記下各平皿的菌落數後，求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數。若平皿中有連成片狀的菌落或花點樣菌落蔓延生長時，該

平皿不宜計數.若片狀菌落不到平皿中的一半，而其餘一半中菌落數分佈又很均勻，則可將此半個平皿菌落計數後乘以2，以代表全皿菌落數。

（2）黴菌和酵母菌菌落計數

先點數每個平板上生長的黴菌和酵母菌菌落數，求出每個稀釋度的平均菌落數。判定結果時，應選取菌落數在20～100個範圍之內的平皿計數，乘以稀釋倍數後，即為每g(或每mL)檢樣中所含的黴菌和酵母菌數。其它範圍內的菌落數報告應參照菌落總數的報告方法報告之。

每g(或每mL)化粧品含黴菌和酵母菌數以CFU/g(mL)表示。

7、評定標準

化粧品的微生物學質量應符合下述規定：

（1）眼部、口脣、口腔粘膜用化粧品以及嬰兒和兒童用化粧品細菌總數不得大於500/ml或500/g。

（2）其它化粧品細菌總數不得大於1000/ml或1000/g。

[注意事項]

（1）所採集的樣品，應具有代表性，一般視每批化粧品數量大小，隨機抽取相應數量的包裝單位。檢驗時，應分別從兩個包裝單位以上的樣品中共取10g或10ml。包裝量小的樣品，取樣量可酌減。

（2）供檢樣品，應嚴格保持原有的包裝狀態。容器不應有破裂，在檢驗前不得啟開，以防再污染。

（3）製成供試液後，應儘快稀釋，注皿。一般稀釋後應在1小時內操作完畢。

（4）注意抑菌現象。由於防腐劑未被中和，往往使平板計數結果受影響，如低稀釋時菌落少。而高釋釋度時菌落數反而增大。

（5）在檢驗過程中，從開封到全部檢驗操作結束，均須防止微生物的再污染和擴散，所用器皿及材料均應事先滅菌，全部操作應在無菌室內進行。或在相應條件下，按無菌操作規定進行。

二、口服藥物的微生物學污染狀況檢測

1、樣品採集

按無菌方法隨機抽取各種品牌牙膏、成人護扶品（膏、霜、洗面奶、爽膚水、粉餅等）、嬰幼兒用護扶品（爽身粉、面霜等）。

2、樣品的製備

按無菌方法取藥粒10g或10ml投入到裝有90ml的無菌生理鹽水中，搖動至完全溶解，即為1：10樣品液，按前述方法相應可製備1：100、1：1000的稀釋液。

2、菌落總數檢驗

將融化並冷至45℃～50℃的營養瓊脂培養基傾注到平皿內，每皿約15mL，隨即轉動平皿，使樣品與培養基充分混合均勻，待瓊脂凝固後，翻轉平皿，置37℃培養箱內培養48h。另取一個不加樣品的滅菌空平皿，加入約15m營養瓊脂培養基，待瓊脂凝固後，翻轉平皿，置37℃培養箱內培養48h，為空白對照。

4、黴菌和酵母菌數的檢測

取1：10的檢液各1mL分別注入2個滅菌平皿內,(若菌量較多時可順序再做10倍稀釋)，另取1個滅菌

空平皿(作空白對照)，每皿分別注入融化並冷至45℃左右的虎紅培養基約15mL，充分搖勻。凝固後，翻轉平板，置28℃培養箱，培養3天，計數平板內生長的黴菌和酵母菌數。若有黴菌蔓延生長，為避免影響其它黴菌和酵母菌的計數時，於48h應及時將此平板取出計數。

5、評定標準

口服生化藥品衞生標準：細菌總數＜1000cfu/g，黴菌數＜100cfu/g

[實驗報告]

1、分別將實驗測出的樣品數據以表格方式報告結果。（水、食品各1個表格）

2、對樣品菌落總數作出是否符合衞生要求的結論。

[思考題]

從你所檢測的化粧品和藥物的各指標的結果來看，是否符合國家的衞生標準？如果有超標情況，你認為主要由哪些因素造成？

篇二：生物化粧品

生物化粧品

概述

生物化粧品是指把現代生物工程技術應用到化粧品中，利用基因重組技術，體外獲得具有生物效應的生物活性因子。和原始化粧品相比，它更強調功能性、安全性、親和性，從根本上調理和改善皮膚健康狀態。

發展歷程生物技術這門學科在20世紀70年代興起，在21世紀蓬勃發展，自從DNA雙螺旋結構發現後，生物可以説給人來掀起了一場革命，經過幾十年的技術積累，生物技術已經廣泛滲透於能源、醫療、農業和環境等相關學科領域中，並逐步的實施到人們的日常生活。同樣，在21世紀的今天現代生物技術的飛速發展和廣泛應用也給化粧品行業帶來了全新的發展機遇。

化粧品經歷了一個漫長的過程，從油脂類這種單純的物理防護到油水混合乳化護膚，而添加木瓜、人蔘、蘆薈等這些天然植物的提取物是一大跨越，不過新的時代已經來臨，從上世紀末，美、法等國家已經開始把生物技術應用化粧品中，生物美容時代算是革命性的進展，其本質區別是作用目標更加明確，利用生物活性因子在分子水平上對受損細胞進行修復和調整，改善其組織和代謝，促進皮膚細胞生長，調節皮膚平衡，從根本上達到保健皮膚、保持青春的目的。

什麼是生物活性因子

生物活性因子主要通過基因表達技術，歷經發酵、純化等複雜工藝，嚴格控制各種雜誌含量。天津強微特生物科技有限公司生產的生物蛋白因子，各項指標達到或超過中國藥典標準，根據高效液相色譜（HPLC）檢測，純度超過95%。以下是在護膚品中使用較多的三種蛋白因子：

人表皮生長因子（hEGF）/人寡肽1（Humanoligopeptide-1）：

對受損皮膚、創傷皮膚和改建性皮膚具有良好的修復、護理作用。特別適用於美容手術後皮膚的護理和恢復，有縮短創傷癒合時間和減少疤痕形成的作用。

促進皮膚各類細胞的新陳代謝，增強皮膚細胞對營養物質的吸收，減緩皮膚的衰老，改善皮膚的光澤。

促進蛋白合成，調節皮膚膠原蛋白的降解和更新，增強皮膚彈性，減少皮膚皺紋的形成，撫平皮膚已有的細紋。

防止和護理痤瘡。

鹼性成纖維細胞生長因子（bFGF）/人寡肽3（Humanoligopeptide-3）：

改善細胞生長的微環境，促進彈性纖維和膠原蛋白的合成，使肌膚富有

彈性，是皮膚處於滑潤狀態。

促進成纖維細胞的生長髮育，增強細胞的新陳代謝，減少皮膚皺紋的生成。降低皮膚細胞中黑色素和有色細胞的含量，減輕皮膚色素的沉積。

角質形成細胞生長因子（KGF）/INCI名稱：人寡肽5（Humanoligopeptide-5）：促進上皮細胞的增殖和分化，促進傷口癒合。